技術文章
TECHNICAL ARTICLESExpi293表達培養基并不直接兼容ProBond或Ni-NTA純化系統。我們推薦在用His標簽的純化操作之前進行一次緩沖體系交換或樣本透析。
大多數293細胞系均能適應從傳統含血清或其它無血清培養基向Expi293表達培養基中的切換按照手冊中所描述的直接切換法或序貫切換法來操作,大多數293細胞系均能適應從傳統含血清或其它無血清培養基向Expi293表達培養基中的切換。 注意:切換后的細胞可能無法達到與Expi293F細胞同等的高水平表達。
我們推薦使用pcDNA 3.4-TOPO TA載體(貨號A14697)。這一載體含有天然的全長CMV啟動子和克隆位點下游的WPRE(旱獺轉錄后調控元件),這兩個元件均有利于基因的高水平表達(表達比pcDNA3.3 TOPO載體高大約2-3倍,而后者又比標準的pcDNA載體高2-5倍)。當然,實際表達水平還要視具體蛋白而定。